紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理
光源產(chǎn)生的連續(xù)輻射,經(jīng)單色器色散后,通過(guò)樣品池,一部分輻射被待測(cè)液吸收,未被吸收的部分到達(dá)檢測(cè)器,光信號(hào)被轉(zhuǎn)變成電信號(hào)并加以放大,信號(hào)數(shù)據(jù)被顯示或記錄下來(lái)。
分光光度計(jì)類別的發(fā)展
1 單光束分光光度計(jì)
該種分光光度計(jì)的特點(diǎn)為:結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,從光源到檢測(cè)器只有一條光路,測(cè)量時(shí),光束經(jīng)單色器分光后輪流通過(guò)參比溶液和試樣溶液,測(cè)量光強(qiáng)度。在一系列不同波長(zhǎng)處分別測(cè)定試液的吸光度或透光度繪制出吸收光譜圖。其缺點(diǎn):測(cè)量結(jié)構(gòu)受電源波動(dòng)的影響較大,適用于只在一個(gè)波長(zhǎng)處作吸光度測(cè)定的定量分析。
2 雙光束分光光度計(jì)
光源的光束經(jīng)單色器后又被反射鏡分解成兩路強(qiáng)度相等的光束,并分別射人參比池和試液池,這就消除了單光束儀器受光源強(qiáng)度變化的影響。測(cè)定時(shí)進(jìn)行波長(zhǎng)掃描可以連續(xù)地繪出吸收光譜曲線。
3 雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)
由同一光源發(fā)出的光被分成兩束分別經(jīng)過(guò)兩個(gè)單色器,從而同時(shí)可以得到兩個(gè)不同波長(zhǎng)的單色光,交替照射同一液,測(cè)得的信號(hào)實(shí)際上是兩波長(zhǎng)處吸光度之差。其特點(diǎn)為:測(cè)量時(shí)不必使用空白溶液作參比,消除了制備空白溶液產(chǎn)生的誤差;使用同一光源獲得兩束單色光,減少了光源電壓變化產(chǎn)生的誤差,靈敏度較高。
4 多通道分光光度計(jì)
與常規(guī)不同的是使用了光二極管陣列檢測(cè)器(DAD)由光源發(fā)出的輻射聚焦到吸收池上,通過(guò)吸收池后到達(dá)光柵,經(jīng)分光后照射到DAD上。