在檢定紫外可見分光光度計的實踐中，有較多以棱鏡分光的儀器，在檢定它們的透射比時，在被檢的個別波長點出，如果不加入儀器所配置的濾色片，則有嚴(yán)重的偏低現(xiàn)象，如加入濾色片則有明顯的提高，這種顯然是由于雜散光引起的異?，F(xiàn)象，過去人們一直因為按線性的檢定規(guī)程檢定時未能檢出雜散光而被忽視，因此到目前為止還沒有人對產(chǎn)生這種現(xiàn)象做認真仔細的分析。下面將做具體的分析，以供堵著有一個明確客觀的認識。

   理論推導(dǎo)：我們知道標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比特性曲線，任何一個分光系統(tǒng)都無法獲得單一波長的光，比色分析中所謂的單色光是指一定光譜帶寬的光束，這事容易理解的，透射比的誤差與雜散光成正比，當(dāng)雜散光一定時，T值越大，誤差表現(xiàn)的也越明顯。

   關(guān)于加入濾色片后光譜帶寬變大的影響：為了除去雜散光，在實際檢定過程中需要進行濾光，但加入濾光片后將減弱光強，對有些分光光度計就需要調(diào)大狹縫寬度來補償光強的減弱，使空白值調(diào)到100%T，這樣顯然會增大光譜帶寬，增大光譜帶寬不會帶來前文提及的異?，F(xiàn)象。實踐說明，加入濾色片后的測得值在透射比峰值處稍低些，但基本上無明顯的變化，這與前文中的異?，F(xiàn)象無關(guān)，排除了異?，F(xiàn)象是由于加入濾色片后因帶寬增加而帶來透射比值提高的可能性。

   雜散光波長的推測及雜散光含量的估算：標(biāo)準(zhǔn)溶液選擇了235nm，257nm，313nm，350nm；紫外標(biāo)準(zhǔn)濾光片選取了270nm，293nm，350nm。主要討論標(biāo)準(zhǔn)溶液的313nm和紫外標(biāo)準(zhǔn)濾光片的350nm處，因為這兩點處透射率受雜散光影響時，透射率數(shù)值明顯上偏差。測定值總是偏低的，因為這兩點是極大值點，根據(jù)前述的理論推導(dǎo)這是不難理解的。但雜散光究竟是來自長波方向還是短波方向，按現(xiàn)行的單光束紫外可見分光光度計檢定規(guī)程檢定方法可以查出來自長波方向雜散光，但由于來自短波方向的雜散光則無法查出。在實際工作中，很多一起按現(xiàn)行規(guī)程檢測出雜散光后透射比的異常現(xiàn)象仍然存在，這就說明了還有來自短波方向的雜散光。