雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是依據(jù)物質(zhì)在紫外、可見(jiàn)光區(qū)的吸收光譜特性和朗伯-比爾定律的原理，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析的儀器&，器廣泛應(yīng)用于石油’醫(yī)藥、化工、衛(wèi)生防疫等部門(mén)。為確保儀器出具數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，必須經(jīng)過(guò)計(jì)量

部門(mén)的周期檢定，對(duì)使用頻率高對(duì)儀器技術(shù)指標(biāo)要求高的部門(mén)，要經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。

1、雙光速紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)使用過(guò)程要經(jīng)常進(jìn)行基線校正：對(duì)儀器進(jìn)行各項(xiàng)校準(zhǔn)前一定要校準(zhǔn)基線。不同的儀器操作不同，有的是點(diǎn)“baseline”有的是點(diǎn)“zero”還有其他操作方法。

2、基線平直度的測(cè)量：做完“校準(zhǔn)基線”后即測(cè)量此項(xiàng)指標(biāo)。要想得出準(zhǔn)確的結(jié)果，條件設(shè)定很關(guān)鍵，選擇光度計(jì)的“波長(zhǎng)掃描”功能，波長(zhǎng)范圍：全波段；帶寬：2nm；掃描速度：中速；縱坐標(biāo)范圍的設(shè)定也很重要，單位選擇“透射比”，可設(shè)定為95%-105%或98%-102%，以便清晰看出100%線的變化。

3、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與重復(fù)性的測(cè)量：目前國(guó)際上使用的標(biāo)準(zhǔn)有汞燈、氧化鈥溶液或氧化鈥濾光片，這些標(biāo)準(zhǔn)都有較豐富的光譜峰，選用儀器的“波長(zhǎng)掃描”功能，宜用掃描速度慢，相應(yīng)時(shí)間小，這樣可以避免附加誤差。要特別注意“采樣間隔”的設(shè)定，為了準(zhǔn)確得出峰值波長(zhǎng)的數(shù)據(jù)，宜采用“0.1nm”但有的無(wú)法設(shè)定“采樣間隔”，“波長(zhǎng)范圍”的起始波長(zhǎng)與終止波長(zhǎng)相隔不超過(guò)200nm才能得出準(zhǔn)確的峰值數(shù)據(jù)，想要把氧化鈥濾光片的特征峰235-640nm掃描一遍，要分三段設(shè)定。大部分儀器可以直接設(shè)定所要的“采樣間隔”

4、透視比準(zhǔn)確度和重復(fù)性的測(cè)量：操作上使用儀器的“定量測(cè)量”功能，用戶使用儀器的該項(xiàng)功能較多，盡量選用“多波長(zhǎng)測(cè)量”。為保證測(cè)量準(zhǔn)確，應(yīng)正確使用標(biāo)準(zhǔn)溶液：

1）對(duì)測(cè)量用吸收池的要求，采用光徑長(zhǎng)度為10.00mm的石英池盛裝標(biāo)準(zhǔn)溶液，吸收池的兩透光面應(yīng)無(wú)劃痕、油漬或液體污染，否則會(huì)產(chǎn)生一些散射光甚至熒光干擾測(cè)量，安裝吸收池至樣品框架上應(yīng)遵循一定的方向，可按吸收池箭頭所標(biāo)方向正對(duì)入射光方向，以減少吸收池兩透光面的不平行性帶來(lái)的誤差。

2）必須事先對(duì)儀器波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn)后，才能使用標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)量透射比準(zhǔn)確度。